Ksantoproteinovaya reaksjon til protein: tegn og formel ligning

For å etablere den kvalitative sammensetning av mange matvarer som brukes ksantoproteinovaya reaksjon til proteinet. Tilstedeværelsen av aromatiske aminosyrer i blandingen vil endre seg i en positiv testprøve farge.

Hva er protein

Det kalles også et protein, som er et byggemateriale for den levende kroppen. Proteiner opprettholde muskelstørrelse, gjenopprette skadde og døde vev strukturer av ulike organer, det være seg hår, hud og leddbånd. Med deres medvirkning, produserer røde blodlegemer, er styrt av den normale drift av mange hormoner og immunsystemceller.

Dette er et komplekst molekyl som er et polypeptid med en masse større enn 6 ~ 10 ³ dalton. Proteinstruktur som danner aminosyrerester i et stort antall koblede peptid-bindingen.

Strukturen av proteiner

De karakteristiske trekk ved disse stoffer sammenlignet med lavmolekylære peptider er at de er utviklet en tredimensjonal struktur, understøttet effekter med varierende grad av tiltrekning. Proteiner har fire-struktur. For hver av dem har sine egne særtrekk.

Som grunnlag av den primære organisering av molekyler avledet aminosyresekvens, struktur som gjenkjenner ksantoproteinovaya reaksjon til proteinet. Denne strukturen er en periodisk repeterende peptidbinding -HN-CH-CO-, en selektiv del radikaler er sidekjedene i aminosyrene. De definerer ytterligere egenskaper til forbindelsen som en helhet.

Den primære proteinstruktur anses som sterk nok, er dette på grunn av tilstedeværelsen av sterke kovalente interaksjoner i peptidbindinger. Dannelsen av påfølgende nivåer forekommer avhengig av de egenskaper som er angitt i den innledende fasen.

Dannelsen av den sekundære struktur er mulig på grunn av vridning av aminosyresekvensen i en spiral, der hydrogenbindinger er etablert mellom vindingene.

Høyere nivå organiseringen av molekyler som dannes ved å anvende en av en spiral på de andre fragmenter med forekomsten av alle mulige forbindelser mellom dem, med hydrogen, disulfid, kovalent eller ionisk forbindelse. Resultatet er en tilknytning i form av små dråper.

Den romlige anordning av de tertiære strukturer med dannelse av kjemiske bindinger mellom dem fører til dannelsen av den endelige formen av molekylet eller kvaternære nivåer.

aminosyrer

De forårsaker de kjemiske egenskaper av proteiner. Det er omtrent 20 store aminosyrer som utgjør polypeptidene i en annen rekkefølge. Dette også er referert sjelden aminokarboksylsyre i form hydroksyprolin og hydroksylysin avledet basisk peptid.

Som et tegn på gjenkjennelse ksantoproteinovaya protein reaksjon, tilstedeværelse av visse aminosyrer gir fargeendring av reagenser, noe som tyder på tilstedeværelsen av bestemte strukturer i deres sammensetning.

Som det viste seg, er de karboksylsyrer som har forekommet substitusjonen av et hydrogenatom i aminogruppen.

Et eksempel på strukturen av molekylet kan tjene en strukturformel glycin (HNH- hvor x + COOH) som den enkleste aminosyre.

I dette tilfelle ett av hydrogenatomene _CH2 - kan være erstattet av en karbon lengre radikal som omfatter en benzenring, amino, sulfo, karboksy.

Hva gjør ksantoproteinovaya reaksjon

For kvalitativ analyse av proteiner ved anvendelse av forskjellige teknikker. Disse inkluderer reaksjoner:

• biuret med utseendet av fiolett farge;
• ninhydrin for å danne en blå-fiolett løsning;
• formaldehyd med etablering av en rød farge;
• Nogier å felle ut den grå-svart farge.

Ved utførelse av hver metode påviste tilstedeværelse av proteiner og tilstedeværelsen av visse funksjonelle grupper i molekylet.

Det ksantoproteinovaya reaksjon til proteinet. Det kalles også sammenbrudd Mulder. Det refererer til de fargereaksjoner for proteiner, der det er aromatiske og heterocykliske aminosyrer.

Et trekk ved en slik prøve prosess er nitrering Salpetersyre cyklisk aminosyrerestene i særdeleshet tiltredelse av nitrogruppen til benzenringen.

Resultatet av denne prosessen er dannelsen av nitroforbindelser, som utfelles. Dette er den grunnleggende funksjonen ksantoproteinovaya reaksjon.

Hva bestemt aminosyre

Ikke alle aminokarboksylsyre kan detekteres ved hjelp av en slik prøve. Hovedtrekket av ksantoproteinovaya proteinpåvisningsreaksjon - tilstedeværelsen av benzenringen eller heterocyklisk ring i molekylet aminosyrer.

Fordi proteinet isoleres fra aminokarboksylsyrer to aromatiske, der det er en fenyl- gruppe (fenylalanin), og en hydroksyfenyl radikal (i tyrosin).

Med ksantoproteinovaya reaksjon bestemmes heterocyklisk aminosyre tryptofan, indol med en aromatisk kjerne. Tilstedeværelsen av de ovennevnte forbindelser i proteinet gir den karakteristiske fargeendring på testmiljø.

Hvilken nytte reagenser

For gjennomføring av reaksjonen ksantoproteinovaya trenger for å fremstille en 1% oppløsning av eggprotein, eller vegetabilsk opprinnelse.

Vanligvis brukes egg, som er delt for ytterligere separasjon av proteinet fra eggeplomme. For en 1% oppløsning av protein ble fortynnet i en tidobbelt mengde av renset vann. Etter oppløsning av den resulterende proteinvæske bør filtreres gjennom flere lag osteklede. Denne løsningen bør oppbevares på et kjølig sted.

Det er mulig å utføre reaksjonen med et vegetabilsk protein. For å fremstille oppløsningen anvendes hvetemel i en mengde på 0,04 kg. 0,16 liter av renset vann. Ingrediensene ble blandet i en kolbe som er koplet i 24 timer på et kjølig sted ved en temperatur på ca. + 1 ° C På slutten av dagen ble oppløsningen omrørt, etterfulgt av filtrering derav først med vatt og deretter - en papirfoldefilter. Den resulterende væske ble holdt på et kjølig sted. Denne løsningen er hovedsakelig til stede i den fraksjon albumin.

For gjennomføring av reaksjonen ksantoproteinovaya som hoved reagens som anvendes salpetersyre kons. Ytterligere reagenser er en løsning av 10% natriumhydroksid eller ammoniakk, gelatinoppløsningen og ukonsentrert fenol.

Metodikken i

I et rent rør er fremstilt 1% proteinløsning -te egg eller mel i en mengde på 2 ml. Til dette tilsettes ca. 9 dråper konsentrert salpetersyre til flokkulering stoppet. Den resulterende blanding ble varmet opp, resulterende gule bunnfall forsvinner gradvis, og dens farge går i løsning.

Når væsken kjøles ned i røret langs veggen tilsettes omtrent 9 dråper av natriumhydroksyd, konsentrert, noe som er overflødig for prosessen. Reaksjonsmediet blir alkalisk. Innhold blir oransje farge i reagensrør.

funksjoner av

Siden ksantoproteinovaya kalt kvalitativ reaksjon til salpetersyre ved hjelp av virkningen av proteinene, blir prøven utført under inkludert avtrekkshette. Følg alle sikkerhetsregler når du arbeider med konsentrerte etsende stoffer.

Frigjøringen av innholdet mot røret kan forekomme under oppvarmingsprosessen som må vurderes ved å feste den i en holder og velge helningen.

Oppringning av konsentrert salpetersyre og kaustisk soda bør bare ved hjelp av en glasspipette og pærer gummi forbudt pipetter med munnen.

Relativ reaksjon med fenol

For klarhets skyld prosess og bekreftelse av tilstedeværelsen av fenylgruppene er utført med en lignende prøve hydroksybenzen.

Røret tjente 2 ml fortynnet fenol, deretter gradvis langs veggen, ble det tilsatt 2 ml konsentrert salpetersyre. Oppløsningen ble utsatt for oppvarming, hvorved det blir gul. Denne reaksjonen er kvaliteten av tilstedeværelsen av benzenringen.

Prosessen hydroksybenzen nitreres med salpetersyre, etterfulgt av dannelse av en blanding av p-nitrofenol og o-nitrofenol i en andel av 15 til 35.

Sammenligningstest med gelatin

For å bevise at ksantoproteinovaya reaksjon overfor proteinet avslører en aminosyre med aromatisk struktur, bruke proteiner som ikke har en fenolisk gruppe.

I et rent rør er fremstilt 1% gelatinoppløsning i en mengde på 2 ml. Til dette tilsettes ca. 9 dråper konsentrert salpetersyre. Den resulterende blanding oppvarmes. Løsningen ble ikke farget i gul, noe som beviser fraværet av aminosyrer med en aromatisk struktur. Noen ganger er det en svak gulning av miljøet på grunn av tilstedeværelsen av proteinurenheter.

kjemiske ligninger

I to-trinnsreaksjon går ksantoproteinovaya proteiner. Formel første trinn nitrering Prosessen beskriver aminosyremolekyler ved hjelp av konsentrert salpetersyre.

Et eksempel er festet av nitrogruppen til tyrosin for å danne nitrotyrosine og dinitrotirozina. I det første tilfellet til benzenringen er bundet ett _NO2 -rest, og den andre forbindelse har to hydrogenatomer er erstattet med _NO2. Kjemisk formel ksantoproteinovaya tyrosin-reaksjon som representeres ved reaksjon med salpetersyre for å danne nitrotyrosine molekyl.

Nitrering prosess er ledsaget av overgangs fargeløs fargestoffer i gul tone. Ved utførelse av denne reaksjon med proteiner som inneholder aminosyrerestene fenylalanin eller tryptofan, og farge endres løsnings.

Det andre trinnet er reaksjonsproduktet av nitrering av tyrosin-molekyler, særlig nitrotyrosine, med ammonium eller natriumhydroksyd. Resultatet er et natrium- eller ammonium-salt hvori gul-orange farge. En slik reaksjon er relatert til muligheten for nitrotyrosine molekylene beveger seg i den kinonoide form. Deretter salt dannet derfra Nitronic syre, som har et kinon system av konjugerte dobbeltbindinger.

Således ender ksantoproteinovaya reaksjon til proteiner. Ligningen ovenfor present andre trinn.

resultater

Under analyse av fluider som befinner seg i de tre rør, blir referanseløsningen fortynnet med fenol. Stoffer med en benzenring gi kvalitativ reaksjon med salpetersyre. Som et resultat, endrer det farge av løsningen.

Som kjent, omfatter gelatin et hydrolyserte form av kollagen. Proteinet inneholder ikke den aromatiske struktur av aminosyrene. Ingen endring i farge av mediet ved reaksjon med en syre.

I den tredje prøverør der er en positiv reaksjon på proteiner ksantoproteinovaya. Konklusjon kan trekkes som følger: alle proteiner med aromatisk struktur, enten det er en fenylgruppe eller en indolring, gitt endring i fargen av oppløsningen. Dette skyldes dannelsen av nitroforbindelser med en gul farge.

Gjennomføring av en fargereaksjon viser nærvær av forskjellige kjemiske strukturer på aminosyrer og proteiner. Eksempel gelatin viser at sammensetningen omfatter aminokarboksylsyre ikke å ha en fenylgruppe eller en syklisk struktur.

Med ksantoproteinovaya reaksjon kan forklares ved gulning av huden når den påføres det en sterk salpetersyre. Det samme farge vil bli skummet melk i løpet av hennes tilsvarende analyse.

I klinisk laboratoriepraksis denne fargen prøven ikke blir brukt for påvisning av protein i urinen. Dette skyldes den gule fargen på urinen selv.

Ksantoproteinovaya reaksjon ble stadig mer brukt for kvantifisering av aminosyrer så som tryptofan og tyrosin, som en del av forskjellige proteiner.